产品介绍
无细胞蛋白合成试剂盒(Cell-Free Protein Synthesis Kit)是一款基于大肠杆菌细胞裂解液进行体外蛋白质合成的产品。该产品利用细胞裂解液中的核糖体、翻译因子、酶等活性物质,同时补加能量、核苷酸、氨基酸、无机盐等,在体外重构转录-翻译体系。以DNA或RNA为模板,表达出蛋白质。无细胞蛋白表达是一种不依赖于活菌,能够快速、灵活地大量表达蛋白质,和传统的重组表达体系相比有众多的优势:
1.蛋白表达快,1~2 h即可表达出目的蛋白,8~24 h即可达到最大量。
2.蛋白表达量高,最高可达到3 mg/ml以上的蛋白。
3.反应简单灵活,仅需向反应体系中加入DNA或RNA模板,可使用96孔板或离心管进行反应。
注:本货号产品不适合可溶表达含二硫键的蛋白,不具备二硫键正确折叠的氧化环境;如需可溶表达含二硫键的蛋白,请联系其他货号。
产品组成
组分 | 规格S | 规格M |
Cell-free system solution A | 300 μl | 1.5 ml |
Cell-free system solution B | 600 μl | 3 ml |
CFPS-Control Plasmid | 2 μg | 2 μg |
储运条件
-80℃保存,有效期12个月。
干冰运输。用户开封后,将无细胞蛋白表达反应组分置于-80℃储存。
为避免反复冻融,可根据反应用量,将A液和B液分别分装后用液氮速冻后再置于-80℃储存。
相关问答
Q:使用本品表达其他蛋白,是不是根据提供的质粒骨架进行替换 superfolder GFP 的CDS区域即可?
A:表达其他蛋白时,只替换superfolder GFP会残留N端的标签,如果不需要标签替换从ATG到TAA整个翻译区。
Q:质粒骨架的 T7 启动子→T7 终止子以外的质粒骨架序列是否可以替换?还是必须用您这边的骨架序列?
- A:可以,例如pET9a、pET23a等质粒也可以,重点是T7启动子到T7终止子序列不建议替换,质粒骨架可以换。
Q:加入模板DNA的最低浓度是多少?是否DNA模板加入量和蛋白表达效率相关?
A:
模板DNA浓度低于4 ng/μl,会降低表达量。模板DNA加入量和蛋白表达量有关,建议根据蛋白优化,一般8 ng/μl左右就可以。